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JMT日本医疗——与“器官置换再生医疗”相关的成果-理研确立毛囊干细胞培养方法③
作者:JMT日本医疗 时间:2022-03-24 08:46:07

结果,当在含有抑制BMP信号的Noggin、成纤维细胞生长因子(FGF)、激活HH信号的SAG和表皮生长因子(EGF)的培养基(NFFSE培养基)中使用去端胶原凝胶进行三维培养时。证实具有毛囊器官诱导能力的表皮干细胞具有最高的生长速度,在6天的培养中可扩增至约190倍。


此外,通过荧光激活细胞分选 (FACS) 分析扩增的细胞群表明,作为隆起区域干细胞标志物的 CD34 / Itg6 (整合素6) 双阳性细胞从总数的4%增加到70.8%。


另一方面,在从该培养基中除去EGF的培养基(NFFS培养基)和含有激活Wnt信号和Notch信号的细胞因子的培养基(NFFSWN培养基)中,CD34/Itg6双阳性细胞的比例分别为56.2%和30.6 %,发现低于NFFSE培养基。


结果发现,在NFFS培养的细胞中,负责毛囊下部再生的干细胞标志物Lgr5的表达是137.6倍,而在NFFSWN培养的细胞中,Blimp1的表达是皮脂腺干细胞的标志物,增加了9.01倍。这表明,NFFSE培养基能使具有器官再生能力的毛囊上皮性干细胞在未分化状态下维持并扩增。


因此,为了阐明培养细胞的器官诱导能力,采用器官原基法再生毛囊原基并同域移植到裸鼠皮肤中。然后,据说通过NFFSE培养细胞和NFFS培养细胞从再生毛囊原基确认了相同程度的毛囊再生(再生毛发长出)。

 

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器官原基法对培养细胞的功能分析。(a) 使用培养的毛囊上皮细胞和真皮乳头细胞的器官原基方法示意图。通过在胶原凝胶中以高密度和三维分区排列两种类型的细胞,可以再现作为器官基础的器官原基。(b) 将再生毛囊原基移植到裸鼠皮肤后第19天的立体显微图像,再生毛囊的比例显示毛发生长速度和毛发周期为3次以上。NFFSE培养细胞再生的大部分毛囊(81.0%)表现出3次以上的毛发周期(来源:理研网站)。


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